直接抗人球蛋白(直接Coombs)试验用来确定红细胞(RBC)膜上是否存在IgG抗体或补体(C3d)。患者的红细胞与抗人IgG和C3d的抗体共同孵育。如果IgG或C3d结合到红细胞膜上,则发生凝集反应,即为阳性结果。阳性结果表明存在针对RBC的自身抗体。仅C3d呈阳性结果提示存在冷自身抗体(通常为IgM,因其不被抗人球蛋白试验检测,因该试验所用抗血清仅针对IgG抗体)。阳性检测结果并不总是等同于溶血。因此,应始终结合临床体征和症状对结果进行评估。