传染病的免疫学检测

作者:Maria T. Vazquez-Pertejo, MD, FACP, Wellington Regional Medical Center;
Larry M. Bush, MD, FACP, Charles E. Schmidt College of Medicine, Florida Atlantic University
Reviewed ByBrenda L. Tesini, MD, University of Rochester School of Medicine and Dentistry
已审核/已修订 修改的 1月 2025
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看法 进行患者培训

免疫学检测使用以下方法之一:

  • 抗原用于检测患者标本中针对病原体的抗体

  • 抗体 检测患者标本中病原体的抗原

标本的处理方法各不相同,但如果不能立即进行检验,标本通常应被冷藏或冷冻起来,以防止细菌污染物过度生长。

凝集反应实验

在凝集试验(如乳胶凝集反应、共凝集反应)中,很小的微粒(乳胶粒、明胶颗粒或细菌)与试剂抗原或抗体发生偶联。将产生的颗粒复合物与标本(如脑脊液、血清)混合;如果标本中存在目标抗体或抗原,它会交联这些颗粒,产生可测量的凝集反应。

如果试验结果显示阳性,将体液标本进行连续的稀释并检测。使用稀释度更高的溶液仍发生凝集反应,说明目标抗原或者抗体的浓度较高。滴度正确报告为发生凝集反应的最稀溶液的倒数;例如,32表示在稀释至起始浓度1/32的溶液中发生凝集反应。

一般来说,凝集反应与其他许多方法相比速度较快,但是灵敏度较差。该法亦可用于测定一些细菌的血清型。

补体结合

补体结合试验用于测量血清或脑脊液中消耗补体(固定补体)的抗体水平。这项试验用于诊断一些病毒和真菌的感染,尤其是球孢子菌病

将样本与已知量的补体及目标抗原一起孵育,然后测定待测抗体。补体固定的程度表明样本中这一抗体的相对含量。

试验可以测定IgM和IgG抗体的滴定度,或者可以改良后用于测定相应的抗原。试验是精确的,但是具体应用因为工作量大以及需要大量的对照而受到限制。

酶免疫测定

酶免疫测定试验使用与酶连接的抗体来检测抗原,并检测和量化抗体。例如:

  • 酶免疫法(EIA)

  • 酶联免疫吸附试验(ELISA)

由于大多数酶免疫测定试验的敏感性高,因此它们常常用于进行筛选试验。可以通过类似于凝集反应试验中的连续稀释样本的方法来测滴定度。

试验的灵敏度虽然一般都较高,但是有时可以因为患者的年龄、微生物的血清型、或者是疾病所处的临床阶段等因素影响而变化。

沉淀试验

沉淀试验通过测量凝胶(琼脂糖)或溶液中抗原-抗体复合物的可见沉淀程度,来测定体液中的抗原或抗体含量。 沉淀试验有许多种类(如,ouchterlony双扩散,计数免疫电泳),但是这些试验的应用都极为有限。

通常将血液样本与抗原试剂混合来测定患者的抗体,最常应用于可疑真菌感染或者化脓性脑膜炎。由于取得阳性结果需要大量的抗体或者抗原,因此灵敏度不高。

蛋白印迹(Western blot)法

蛋白印迹法通过检测患者样本(如血清或其他体液)中的抗微生物抗体与已通过印迹法固定在膜上的靶抗原(如病毒组分)的反应来进行检测。

蛋白印迹法通常具有良好的敏感性,虽然常常不如筛查试验(比如ELISA)那样敏感,但通常具有很高的特异性。因此,此项试验常用于在筛选试验得到阳性结果后进行进一步确认。

蛋白印迹法的技术修改是

  • 线免疫分析法(LIA)

  • 使用合成或重组产生的抗原的重组免疫印迹分析(RIBA)

  • 可以快速筛选标本中特定微生物抗原或患者抗体的免疫色谱分析

三者中免疫层析法最易操作且最常用,例如检测产志贺毒素微生物新型隐球菌荚膜抗原及流感病毒

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